人脐静脉血管内皮细胞概述
消化细胞
消化液：用pH7.0-7.2的PBS或D-Hank’S液，分别配制0.25%胰酶液和0.02%EDTA-Na2液，用前按1：1混合。在细胞传代或冻存前先消化细胞。(人脐静脉血管内皮细胞)具体操作如下：吸净培养液，每瓶加消化液1ml，摇匀使其布满培养瓶细胞面。37℃消化2-5分钟。显微镜下看细胞回缩成圆形后，轻轻震动使绝大部细胞脱落后，每瓶加含10%FBS的RPMI-1640液的中和液4-5ml中和胰酶的消化作用，并用吸管轻轻吹打培养面使细胞完全脱落后，吸至15ml无菌离心管内。4℃1500rpm离心10分钟弃上清，再用中和液洗涤细胞，离心弃上清，加适量RPMI-1640液，混匀后取10ul 细胞(人脐静脉血管内皮细胞)悬液加10ul台盼蓝混匀后作细胞计数，按需要做步骤四或五。
细胞传代
方法同步骤二。
细胞冻存
调整细胞数2-5×10个/ml，按含细胞的RPMI-1640液ml数，配制等量的冻存液。冻存液中FBS占80%，DMSO占20%。例：含细胞的RPMI-1640液为8ml，应配冻存液8ml，其中FBS为6.4ml,DMSO为1.6ml，混匀。置细胞悬液于冰浴中，逐滴加入冻存液，边加边摇动。加完后用吸管吹打混匀。于冰浴中分装细胞于冻存管中，1.8ml/管，再将冻存管置于冻存盒内置-80℃冰箱，24小时后转入液氮中保存。
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