貂肺上皮细胞的培养(四)
5）内皮细胞培养
1．取产后的新鲜脐带。如不立即培养可以保存于4℃中，但不宜超过12小时。无菌剪取长10～15厘米一段。其它如胚胎和幼体动物的大血管，亦可用于培养。
2．(貂肺上皮细胞)先用三通注射器吸温PBS液注入脐带的静脉中，洗除残血，注入口处宜用线绳结扎，以防液体返流。
3．用血管钳夹紧脐带一端，从另端向脐静脉中徐徐注入*终浓度为0.1%的胶原酶，待末端出现液体后结扎之，令充满血管，注入口亦应结扎，以防液体返流，消化3～10分钟。
4．(貂肺上皮细胞)吸出含有内皮细胞的消化液，注入离心管中，为获取更多细胞，可再注入温PBS冲洗2～3次彻底清除干净残余细胞，一并注入离心管中离心。
5．吸除上清，加1640培养液，制成细胞悬液，接种入瓶皿中培养，顺利时2～3天内细胞即可长成单层。
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