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BioSafety Level	II
Organism	Homo sapiens
Source Organ	Adipose Tissue
Donor Age	30
Donor Gender	Female
Growth Properties	Adherent
Population Doubling	Expected doubling time of 4 days
Recommended Seeding Density	6,000-8,000 cells/cm^2
Markers	CD44, CD73, CD90 and CD105
Applications	For Research Use Only
Immortalization Method	Serial passaging and transduction with recombinant lentiviruses carrying murine Bmi-1 [Ref. seq.: NM_007552.4] and hTERT [Ref.seq.: NM_198253.2] gene
Description	With its ability to maintain multipotency, mesenchymal stem cells provide new venues for cell-based therapy in restoration of damaged or diseased tissue. Most clinical studies utilize bone marrow-derived stem cells, however adipose-derived stromal cells (ASCs) is emerging as an alternative source for their ease of harvesting. The Immortalized Adipose-derived Stromal Cells- Bmi-1/hTERT is derived from human ASCs that have maintained their primary phenotypes and their ability to respond to osteogenic and adipogenic inductions. After 3 weeks of induced osteogenic differentiation, the immortalized ASCs show nuclear translocation of RUNX2, upregulation of alkaline phosphatase and calcium deposition. Furthermore, the immortalized ASCs-Bmi-1/hTERT exhibit normal karyotype and has been shown to exceed 140 population doublings, making these cells suitable for studies in regenerative medicine.
Procedure Overview
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Propagation	Use of PriCoat™ T25 Flasks (G299) or Applied Cell Extracellular Matrix (G422) is required for cell adhesion to the culture vessels. Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. The base medium for this cell line is Prigrow IV medium available from ABM (TM004). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum (TM999) to a final concentration of 10%, L-glutamine and antibiotics (gentamicin). Optional for better growth: 1-5 ng/mL human recombinant bFGF .Atmosphere: air: 95%, CO2: 5%; Temperature: 37.0°C
Quality Control	1. Real Time PCR, immunofluorescence, and telemorase activity was used to quantify Bmi-1 and/or hTERT gene expression in the immortalized cell line. 2. Culture tested negative for mycoplasma
Reference	Nemet, K., et al (2012). Combined introduction of Bmi-1 and hTERT immortalizes human adipose tissue-derived stromal cells with low risk of transformation. Biochemical and Biophysical Research Communications (2012) 422, 28-35.
Disclaimer
联系方式	何经理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898 400-8702-898， E-mail：info@qingbio.com http://www.qingbio.com QQ:514713116

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