ATCC CRL-12203~UMNSAH/DF-1~鸡胚成纤维细胞

出品公司:	ATCC
细胞名称:	ATCC CRL-12203(UMNSAH/DF-1), UMNSAH/DF-1, 鸡胚成纤维细胞
存储人:	Regents of the University of Minnesota
种属来源:	鸡
组织来源:	胚胎，自发永生化
细胞形态:	成纤维细胞样
生长特性:	贴壁生长
培养基:	DMEM培养基(GIBCO,货号12800017)，90%；FBS，10%。
产品目录号:	CRL-12203
生长条件:	气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37  ℃,
传代方法:	1：2至1：6，每周2次。
冻存条件:	90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存
支原体检测:	阴性
**等级:	1
应用:	该细胞可作为病毒传播、重组蛋白表达和重组病毒生产的基质。
联系方法:	何经理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898     400-8702-898    E-mail：info@qingbio.com 网址：http://www.qingbio.com     QQ:514713116

ATCC CRL-12203~UMNSAH/DF-1~鸡胚成纤维细胞特点和简介

UMNSAH/DF-1是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株，自发永生化。 分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养；传代直到衰老；在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满；不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。 在软琼脂上没有观察到克隆增殖，说明这些细胞是永生化而没有转化。 这株细胞可作为病毒增殖、重组蛋白表达和重组病毒生产的基质。 在本库通过支原体检测。

ATCC CRL-12203~UMNSAH/DF-1~鸡胚成纤维细胞接受后处理

1) 收到ATCC CRL-12203(UMNSAH/DF-1)细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养 基。
5) 接到ATCC CRL-12203(UMNSAH/DF-1)细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联 系。

ATCC CRL-12203~UMNSAH/DF-1~鸡胚成纤维细胞培养操作

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然 后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养 过夜）。**天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果ATCC CRL-12203(UMNSAH/DF-1)细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。        

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶 中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落 ，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中 或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞， 根据细胞数量加 入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻 存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时 以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

ATCC CRL-12203~UMNSAH/DF-1~鸡胚成纤维细胞培养注意事项

1. 收到ATCC CRL-12203(UMNSAH/DF-1)细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述 现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、 所需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户 自行承担。
3.   用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细 胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴 壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜 培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为 您再免费寄送一次。
4.   静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培 养，待ATCC CRL-12203(UMNSAH/DF-1)细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6.   建议客户收到ATCC CRL-12203(UMNSAH/DF-1)细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 ******* 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系 ，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。

  合肥星肽生物科技有限公司作为美国ATCC专业代理商，专业经营ATCC菌种、ATCC原代细胞、培养基、抗体、生物试剂、耗材等，我公司和ATCC共同努力致力于为客户提供可靠的研究材料以及方便快捷的服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到*终售后的确保项目准确到位，都有相关专业人士进行维护,确保您在我公司获得*上等服务！

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