细胞简介:
小鼠卵泡膜细胞分离自卵巢组织;卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与
睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡, 卵泡呈黄色, 卵果表面密布血管。
卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类
只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的—对卵圆形的生殖器官, 它的外表有—层上皮组织, 其下方有薄层的结缔
组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由
疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。哺乳动物的卵巢内卵泡的发音需要相关激素的调节才能完成, 垂
体促性腺激索(卵泡刺激素和黄体生成索)使原始卵泡开始发育,其过程中还产生大量的雌激素。雌激素是卵巢的颗粒细胞
和卵泡膜细胞在垂体促性腺激素的作用下协调合成的, 卵泡膜细胞合成的雄激素透过基膜进入颗粒细胞, 并转变为雌激
素。因此, 卵泡膜细胞在生殖内分泌调节中占有关键的位置, 了解其在病理及生理中的作用,对于与性激素有关的妇产
科疾病如多震卵巢综合症、卵巢癌等)的研究有着重要意义。在哺乳动物卵泡生长发育的过程中,卵母细胞由不断增加的
颗粒细胞层包裹。卵巢组织中的膜细胞作为卵泡的外层细胞可以维持卵泡结构的完整性,参与构成卵母细胞和颗粒细胞
发育的微坏境且为类固醇激素的生成提供底物。在哺乳动物中调节膜细胞类固醇激素生成的机制已见相关报道,但是有
关卵泡膜细胞的聚集、生长和分化的研究尚不深入。
小鼠卵泡膜细胞接受后处理
1) 收到非红系有核细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
小鼠卵泡膜细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。**天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
小鼠卵泡膜细胞培养注意事项
1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
合肥星肽生物科技有限公司作为美国ATCC专业代理商,专业经营ATCC菌种、ATCC原代细胞、培养基、抗体、生物试剂、耗材等,合肥星肽生物科技有限公司与ATCC共同努力致力于为客户提供可靠的研究材料以及方便快捷的服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到*终售后的确保项目准确到位,都有相关专业人士进行维护,确保您在合肥星肽生物科技有限公司获得*上等服务!
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小鼠卵泡膜细胞说明书pdf版和相关资料下载
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