除去保护
Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂(piperidine)去除氨基的保护基团。
激活和交联
下一个氨基酸的羧基被一种激活剂所激活。(蛋白多肽)化学工艺常用HBTU/HCTU/HITU/HATU+NMM/DIPEA或HOBT+DIC作激活剂,激活的单体 与游离的氨基反应交联,形成肽键。在此步骤使用大量的超浓度试剂驱使反 应完成。循环:这两步反应反复循环直到合成完成。 氨基酸缩合结束后,(蛋白多肽)可用适量TFA进行洗脱,根据起酸碱性,可选择10%TFA/DCM溶液,至100%TFA,以此类推。
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