shRNA慢病毒载体
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞.
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。
载体的技术特点
1、大大提高对于一些较难转染的细胞, 如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等转导效率
2、快速获得高水平的表达
3、目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加
4、将免疫反应降到*低
5、能够插入大的片段(~7.5 kb)
6、能够应用于干细胞研究
7、*低的细胞毒性
慢病毒表达系统
本公司使用的慢病毒表达系统,它由三部分组成:慢病毒表达载体、慢病毒包装质粒、可产生假病毒颗粒的细胞系。
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。
慢病毒介导的 siRNA活体实验用病毒液服务流程
对于活体 RNAi实验模型,SYNTHBIO公司可以为您生产高质量的病毒液,服务流程如下:
根据目的基因相关信息(序列,序列号等),利用高效的设计软件,设计 siRNA序列,针对每条目的基因,我们设计4条siRNA序列,其中1条序列为阴性对照组;
根据设计好的 siRNA序列,设计,合成两条互补的短片段的DNA;
对合成好的 DNA片段进行稀释,退火,连接到线形化处理过的载体,转化,涂平板,过夜培养;
通过 PCR的方法筛选阳性菌落,进行测序,分析测序结果;
对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高质量的不含内毒素的 siRNA病毒穿梭质粒;
利用构建好的质粒做转染实验, 48小时后通过实时荧光定量和Western的方法分析目的基因,筛选出一条*有效的siRNA序列;
筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞,进行病毒包装和生产,收集病毒液;
浓缩、纯化病毒液,测定滴度;
提供高质量的病毒液给客户(对于活体实验,我们建议的病毒基本单位为 1×10^9TU/ml ,对于小鼠尾静脉给药建议50~100ul/只)
Lentiviral shRNA的基因沉默效率
Lentiviral shRNA 抑制生长导管形成
Lentiviral shRNA 引起的表型变化
即用型Lentivirus shRNA构建包装服务
Lentivirus shRNA服务特点:
1、适用于原代培养细胞,难以转染的各种细胞
2、可用于制备多种稳定沉默特定基因的细胞株
3、您通过********** SupersilencingTM Vector方法筛选到有效的的基因沉默靶点,如果您需要构建慢病毒载体来满足实验需求
Lentivirus shRNA载体
********** Supersilencing Vector 干扰载体
包装载体:Helper vector-I
Helper vector-II
Helper vector-III
提高包装效率和对特定细胞的感染力,提高生物**性
品质保证
客户自己提供的序列委托我们制备的病毒颗粒,我们确保制备的病毒颗粒携带片段的正确性,确保病毒颗粒的总数和病毒颗粒的滴度达到合同规定的要求。
siRNA高效表达慢病毒载体构建
1. 通过专业设计人员的精心筛选获得欲筛选的siRNA序列。
2. 设计siRNA 正义、反义链,选择相应loop结构,加上酶切位点的目的序列。
3. 合成相应的DNA序列,然后克隆于相应的慢病毒表达载体。
4. 将载体转化到宿主菌中进行克隆、筛选,得到质粒重组体即siRNA表达载体。
5. siRNA表达载体在真核细胞中可产生siRNA,从而在细胞内产生特定基因的沉默效果。此方法是多种siRNA制备方法中唯壹可以进行长期基因沉默研究的方法。
本公司为您提供siRNA高效表达慢病毒载体构建服务。构建好的siRNA表达载体,可直接用于转染细胞进行RNA干扰操作。
服务要求
1. 通过E-mail发送订单,告知选定的相应的基因信息,待构建的靶点信息。靶基因在NCBI数据库中的Gene ID、Accession No.
2. 我们可为您免费设计siRNA序列.
订购流程
1. 请用E-mail或者电话联系SYNTHBIO公司。E-mail:info@synthbio.cn;Tel:0551-68788198。
2. 根据客户提供的基因信息设计siRNA序列,并由客户确认。
3. 根据客户提供的siRNA序列信息或经客户确认的siRNA序列信息设计引物。
4. 根据所选择的慢病毒载体构建相应的siRNA表达载体。
5. 在完成相应的试验后,我们将为您提供一套完整的实验结果,其中包括:实验操作说明、电子版的测序结果及彩图、构建好的siRNA慢病毒表达载体质粒及其甘油菌等。
目录号
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产品名称
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规格
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价格
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交货期限
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HSC06001
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慢病毒干扰载体LV-1 (pGLVU6/GFP)
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50μg
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¥1,000
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2周
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HSC06002
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慢病毒干扰载体LV-2 (pGLVU6/Puro)
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50μg
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¥1,000
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2周
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HSC06003
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慢病毒干扰载体LV-3 (pGLVH1/GFP+Puro)
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50μg
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¥1,000
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2周
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HSC06004
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慢病毒干扰载体LV-9 (pGLVU6/RFP)
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50μg
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¥1,000
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2周
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HSC06005
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慢病毒干扰载体LV-10 (pGLVU6/RFP/Puro)
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50μg
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¥1,000
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2周
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病毒包装及滴度测定
根据客户的需要克隆目的片段或shRNA序列到所需要的慢病毒载体,然后进行细胞转染及病毒生产。
产品提供形式
1 构建好的慢病毒载体**次包装与纯化,滴度至少为1×10^8TU/ml。
2 包装与纯化后的病毒载体续包装,每次包装滴度至少为1×10^8TU/ml。
3 如果需要大量病毒液用于动物实验,我们可提供滴度达10^10 TU/ml以上高度纯化的病毒液。
4 现有的GAPDH阳性对照病毒液,每支包装滴度至少为1×10^8TU/ml。
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目录号
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产品名称
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规格
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价格
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交货期限
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HSD01001
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客户定制序列的慢病毒颗粒(提供免费设计)
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一个基因一个序列 (1ml,10*8 TU/ml)
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¥2,880
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3周
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HSD01002
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客户定制序列的慢病毒颗粒(提供免费设计)
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一个基因一个序列 (1ml,10*9 TU/ml)
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¥3,880
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3周
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HSD02001
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shRNA慢病毒超值套餐 (一个基因设计4个序列,一个阴性对照,各1ml,10*8 TU/ml)
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1 套
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¥9,800
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4周
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HSD02002
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shRNA慢病毒超值套餐 (一个基因设计4个序列,一个阴性对照,各1ml,10*9 TU/ml))
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1 套
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¥13,000
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4周
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HSD03001
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慢病毒阴性对照(10*8 TU/ml)
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200 ul
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¥500
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6个工作日
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HSD03002
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慢病毒阴性对照(10*8 TU/ml)
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600 ul
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¥1,200
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6个工作日
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HSD03003
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慢病毒阴性对照(10*8 TU/ml)
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1 ml
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¥1,800
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6个工作日
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HSD03004
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慢病毒阴性对照(10*9 TU/ml)
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200 ul
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¥1,000
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6个工作日
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HSD03005
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慢病毒阴性对照(10*9 TU/ml)
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600 ul
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¥2,000
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6个工作日
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HSD03006
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慢病毒阴性对照(10*9 TU/ml)
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1 ml
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¥3,000
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6个工作日
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HSD04001
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筛选有效干扰慢病毒
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1×10^8 TU/ml
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询价
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50-70个工作日
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HSD04002
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筛选有效干扰慢病毒
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1×10^9 TU/ml
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询价
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50-70个工作日
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备注:慢病毒需要干冰件运输,除江浙沪外所有地区,需要加收¥300 运费。
选择合肥星肽生物科技有限公司的理由
生产实力雄厚
合肥星肽生物科技有限公司拥有近2000平方米独立研发中心以及无菌实验室4条完善的多肽生产线,单月可交货3000条多肽精品,生产研发速度快,可快速相应您的需求。
技术设备先进
合肥星肽生物科技有限公司实验室配备了waters LC-MA/MS、waters uplc,waters全自动纯化仪、岛津LCMS、全自动冻干系统、紫外分光光度计等专用精密仪器,为您提供高效专业的技术服务。
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关于合肥星肽生物科技有限公司
合肥星肽生物科技有限公司是一家致力于生命科学和生物技术领域的高科技企业,公司地址位于科教名城———合肥市。公司主营多肽合成、多肽定制、多肽纯化等多肽制备多肽技术服务。在合肥市与中科院的关怀下,2021年初合肥市高新区与中科院分别与合肥星肽生物科技有限公司签订了战略投资协议。
公司位于合肥市高新区安徽中科资城创业孵化器A区,拥有2000平方米独立研发中心以及无菌实验室,四条完善的多肽生产线,配备了Waters LC- MS/MS、Waters UPLC、Waters 全自动纯化仪、岛津LCMS、全自动冻干系统、紫外分光光度计等专用精密仪器保障合肥星肽生物科技有限公司月产3000条精品多肽的生产能力,这些得以让我们可以为客户快速准确的提供各种高质量的多肽产品及服务。
合肥合肥星肽生物科技有限公司始终致力于为您的实验研究提供高品质、稳定性良好的产品,“做您身边的多肽合成专家”一直是每个合肥星肽生物科技有限公司人的目标与方向,励志作为多肽合成行业标准的风向标。公司拥有100余人的专业团队,其中博士研究生、硕士研究生10余人。在此基础上公司配备了一套包含从售前到售后的专业团队,力争做到每个环节都“清晰明了”,对每一个问题都“吹毛求疵”,让您的实验变得更加简单,正是凭借这样的信仰和扎实的多肽合成技术优势,合肥星肽生物科技有限公司已经成为国内外高校与众多生物医药企业诚信的合作伙伴和坚强的技术后盾。
公司秉承“专业锻造品质,服务打造市场”的经营理念,为国内广大客户提供专业的前沿产品、合理的价格、便捷的物流服务。 公司自成立以来,一直致力于多肽合成、多肽定制、多肽纯化等多肽制备多肽技术服务的研究。帮助客户缩短科研周期、节省试验成本,使客户的科学研究具有持续性。 实验室配备一支年轻、专业、富有创造精神且经验丰富的技术团队。
合肥星肽生物科技有限公司目前跟国内外企业有着友好的合作往来。斯坦福大学,牛津大学,北京大学,清华大学,天津大学,浙江大学,中科大,香港理工大学,以及中科院遗传所,过程所,化学所,生物细胞所,微生物所等,北京军科院**医学研究所,武汉病毒研究所等有稳定合作。
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